1.實驗名稱:HE stain(常規染色與判讀)
2.實驗材料與器才:
(1)材料:組織切片(老鼠小腸;石蠟包埋)
(2)藥劑:升酒精(75%,85%,100%),降酒精(100%,85%,75%),二甲苯,Mayer's Hematoxylin、Eosin(伊紅)、阿拉伯膠、自來水
(3)器材:玻璃缸、手套、玻片架、水盒、擦手紙、濾紙、顯微鏡、蓋玻片、滴管、烘箱、鑷子
3.實驗流程:
(1)烤片(AM8烤至PM1:30)後置於玻片架
(2)脫蠟:二甲苯(3缸,每缸5分鐘)
(3)使組織親水:降酒精(100%3缸、85%2缸、75%2缸,每缸5分鐘)
(4)Mayer's hematoxylin3分鐘
(5)流動自來水水洗15分鐘
(6)Eosin3分鐘
(7)使組織親油:升酒精(85%、100%快速浸10下)
(8)二甲苯5分鐘
(9)阿拉伯膠封片(下方墊濾紙):滴適量阿拉伯膠於組織上,將蓋玻片蓋上
(10)以光學顯微鏡判讀
4.實驗結果:
組織有碎裂情形,可能是沒切好
我照片也沒拍好 -`д´-
5.注意事項:
(1)烤片時間必須>30分鐘
(2)玻片浸入/拉出溶劑時都須dip10下;在換入下一缸前須稍微瀝乾
(3)水洗必需使用自來水,因為裡面有二價陽離子幫助呈色
(4)浸升酒精時速度要快,浸太久會脫色
(5)封片時阿拉伯膠的量以能夠覆蓋組織為準,若是滴太多可用擦手紙沾二甲苯擦除,或是將玻片快速浸入二甲苯後再擦拭。殘膠擋到組織會影響判讀
---------------------------不正經分隔線-------------------------
真的是吸二甲苯吸好吸滿,吸到後面都覺得很ㄎㄧㄤ(並沒有
吸到頭暈有點難過(´・_・`)
以前覺得酒精就很臭了二甲苯才真的臭
這是我們組的玻片泡澡在酒精裡的模樣
哈哈好像不太明顯,就是那些橫紋啦
泡了這麼多缸出浴後(?)瀝乾(下面那個圓形的是濾紙吸乾比較快)
這次實驗也是一直在等,計時-換缸-計時-換缸...(下略
當然現在這種事都上機啦~
原稿
留言列表